علاج كبار السن في موسكو للمشترين - خطة بحثية

نشطاء الإيدز في 1980s

استنادًا إلى نتائج مشاركتي السابقة ، عاتبني بعض القراء لعدم وصف خطة فيها ، ولكن فقط فرضية. على الرغم من وجود كليهما. مجرد خطة بعبارات عامة ، وجهة نظر عين الطائر. لكن الفرضية بسيطة للغاية: التراجع اللاجيني هو تجديد لا جيني . لذلك ، من خلال التراجع عن ملف مثيلة الجينات بأي شكل من الأشكال ، فإننا أيضًا نعيد العصر البيولوجي للجسم ، مما يعني أننا نجدده.

إذا كان أي شخص مهتمًا بالخطة التفصيلية لبحثي ، فسأوضحها أدناه. لكن أولاً أريد الإجابة على اعتراض آخر سمعته: "أليس من السهل انتظار بيلمونتي؟" إنه ، بالطبع ، أبسط. الجلوس وانتظار الآخرين لحل جميع مشاكلك أسهل حقًا. ولكن عندما يتعلق الأمر بمرض قاتل ، فهذه ليست استراتيجية جيدة.

إذا كان الأشخاص المصابون بفيروس نقص المناعة البشرية في الثمانينيات يجلسون بصمت وانتظروا ، أعتقد أن نسبة أقل بكثير منهم كانت ستنجو من الهزات المضادة للفيروسات القهقرية المنقذة للحياة. لقد فهموا ذلك جيدًا ، وبالتالي نظموا الآلاف من المظاهرات ، مطالبين بإيجاد علاج لفيروس نقص المناعة البشرية في أقرب وقت ممكن ، وأنشأوا أيضًا " نوادي المشترين دالاس " من أجل تجربة العلاجات التجريبية المختلفة على أنفسهم.

أعتقد أنه يجب معالجة فيروس نقص المناعة البشرية 2.0 بنفس الطريقة. للقيام بكل ما هو ممكن للتطوير السريع لبعض العلاج الفعال على الأقل أكثر أو أقل. لأنه بخلاف ذلك ، فإن والدينا لن يفيوا بمثل هذا العلاج.
ولست متأكدًا من أن بيلمونتي مهووس بهذه الفكرة كما أنا. ولكن حتى لو استمر أيضًا بنشاط في البحث في هذا المجال ، فلا حرج في قيام العديد من الفرق بذلك. على أي حال ، فإن Belmonte هو في المقام الأول عالم. وأنا ممارس. فقط النتيجة النهائية في شكل علاج يطيل العمر هي مهمة بالنسبة لي ، وحتى قيمتها التجارية ثانوية بالنسبة لي. على الرغم من نجاح كل شيء ، أنا متأكد من أن النجاح التجاري سيأتي أيضًا. لكن المال ليس غاية في حد ذاته ، إنه مجرد أداة لتحقيق هدف أكثر أهمية.

في الواقع ، خطة البحث

أولا ، تعليم الأم الصغيرة. إذن ، الفرضية الأساسية: من أجل تجديد شباب الجسم بالكامل بشكل موثوق ، نحتاج إلى دحر الساعة اللاجينية لمعظم خلايا الجسم ، إن لم يكن كل خلية على الإطلاق. بفضل عمل مجموعة Belmonte ، نعلم أن هذا ممكن من خلال توصيل عوامل OSKM (أو عوامل النسخ الأخرى) إلى الخلية. علاوة على ذلك ، تخضع العملية "لمشكلة المعتدل": التراجع ضعيف للغاية ، ولن نحصل على تأثير كبير مضاد للشيخوخة ؛ التراجع كثيرًا ، يمكن أن تصاب بالسرطان ، لأن الخلايا ستفقد نمطها الظاهري وتعود إلى الجذع ، الحالة المتعددة القدرات.

لا تنس أن القدرة على إعادة الخلايا إلى الحالة المتعددة القدرات بشكل فعال كانت بمثابة معيار الاختيار الرئيسي لياماناكا لاختيار 4 عوامل OSKM من المرشحين الأربعة والعشرين الأوليين. لذلك ، على الرغم من أن عوامل OSKM أظهرت فعاليتها للتجديد عن طريق التراجع الجزئي وهي "حلمة في اليد" ، فهي بعيدة عن المثالية لغرض التجديد الآمن. لذا ، من الجدير الاستمرار في البحث عن طرق أكثر أمانًا للتراجع الجيني. من المنطقي أن تبدأ بالتحقق من العوامل العشرين المتبقية من عوامل Yamanaki الـ 24 الأصلية ، وكذلك محاولة استخدام عامل Oct4 وحده ، حيث يوجد دليل على أنه وحده قادر على دحر علم الوراثة اللاجيني وبشكل عام هو "الحارس الرئيسي للبوابة اللاجينية".

من المفيد أيضًا التحقق من طرق إعادة البرمجة الأخرى التي تم تطويرها في السنوات الأخيرة. على سبيل المثال ، انظر إلى طريقة استبدال عوامل النسخ Oct4، Sox2، c-Myc بالأجسام المضادة ، والتي تم نشرها حرفياً هذا الأسبوع . إذا نجح هذا النهج ، فقد لا تكون التلاعبات الجينية ضرورية على الإطلاق ، وتكفي الإدارة الدورية للأجسام المضادة. على الرغم من الإعطاء المتكرر ، قد تحدث مشاكل في الاستجابة المناعية الثانوية.

على أي حال ، بالنسبة لي حتى الآن ، فإن الفرضية الرئيسية للعلاج هي العلاج الجيني ، بمساعدة عوامل انسحاب معينة. لكن إيجاد أفضل العوامل هو نصف المعركة فقط. النصف الآخر هو كيفية توصيلها بأمان ورخص الثمن. برنامج الشيخوخة اللاجينية عنيد جدًا حتى في مواجهة الرشاوى الأسبوعية ، كما أظهر عمل مجموعة Belmonte. لذلك ، من أجل تحقيق تجديد كبير في الناس ، على الأرجح ، سيكون عليك تنشيط عوامل التراجع على أساس شهري أو حتى أسبوعي.

يبدو لي أن أكثر طريقة اقتصادية لتحقيق ذلك هي دمج كاسيت جيني غير نشط خاص ، افتراضيًا (يحتوي على جينات عامل التراجع) في كل خلية من خلايا المريض تقريبًا ، ويفترض أنه يستخدم فيروسات عدسات أو طريقة توصيل متكاملة أخرى. علاوة على ذلك ، يجب تنشيط هذا الكاسيت بشكل دوري من قبل وكيل فريد وخامل يمكن تطويره بشكل منفصل وسيجعل هذا العلاج براءة اختراع. اليوم ، يتم تنشيط هذه الأشرطة ، على سبيل المثال ، مع التتراسيكلين أو الدوكسيسيكلين . باستخدام هذا النهج ، سيتم تحديد تكلفة الحث الأسبوعي للعوامل المضادة للشيخوخة فقط من خلال تكلفة عامل الحث (يفترض أن يكون جزيء صغير أو ببتيد) - أي أنها ستكون رخيصة نسبيًا.

الخطة المثالية التي أراها هي التحسين المتكرر خطوة بخطوة للنهج المثبت بالفعل (تحريض عوامل OSKM باستخدام الدوكسيسيكلين ؛ يمكن تسليم مثل هذا الكاسيت مع عوامل OSKM إلى الجسم باستخدام حامل عدسي ، متوفر في السوق اليوم) والتطوير الموازي للعلاج المثالي (العوامل الأكثر أمانًا والأكثر فعالية) يتم تنشيطه بواسطة وكيل فريد خامل وحاصل على براءة اختراع).

وبالتالي ، يمكن تقسيم البحث إلى ثلاثة مسارات متوازية:

• تطوير نظام الجرعات الأمثل باستخدام 4 عوامل مصدر OSKM
• إيجاد عوامل أو طرق أكثر أمانًا (لا تؤدي إلى إزالة التمايز الكامل) للتراجع اللاجيني
• إيجاد أفضل وسائل توصيل الجينات (يفضل أن تكون براءة اختراع)

بعد ذلك ، سأصف بمزيد من التفصيل جميع مجالات البحث الثلاثة.

مسار البحث 1 (الحلمة في اليد): تطوير نظام الجرعات الأمثل باستخدام 4 عوامل مصدر OSKM

وجدت مجموعة Belmonte أن الفئران تبدأ في الموت بعد 3 أيام متتالية من تحريض OSKM:


لذلك ، استخدموا بروتوكول 2/5 ، حيث تم الفئران (مع النسخة الأولى فقط من الأليل مع كاسيت OSKM - وهذا مهم لأن الأورام المسخية المكونة في الفئران مع نسختين) تعرضت لتحريض OSKM لمدة يومين متتاليين (باستخدام الدوكسيسيكلين) ، ثم حصل على استراحة لمدة 5 أيام قبل تكرار دورة العلاج.

ومع ذلك ، بدأ وزن الفئران في الانخفاض بالفعل من اليوم الثاني من الاستقراء:


هذا يشير إلى أن الحث المتسلسل لمدة يومين ليس هو الأمثل. علاوة على ذلك ، يبدو لي أن استراحة 5 أيام طويلة جدًا ، بناءً على ما أعرفه عن دورات الخلية. أعتقد أن نظام العلاج 1/2 أو 1/3 لديه أفضل إمكانات طويلة الأجل (1 يوم تحريض ، و 2 أو 3 أيام استراحة).

للتحقق من هذه الافتراضات ، فإن الخطوات التالية ضرورية (من الأفضل ترتيب هذه الدراسات من منظمات البحث المجتمعية الكبيرة ، مثل Charles River):

• قم بشراء فئران من النوع البري مع كاسيت جين OSKM في مختبرات جاكسون ، ويفضل أن يكون ذلك في عمر 12 شهرًا.
• ستكون مثالية 30 الفئران السيطرة + 20 مجموعة من 12 الفئران لكل جرعات / أنظمة مختلفة
• تشغيل جميع المجموعات بالتوازي
• بشكل دوري ، خذ الدم واللعاب والبول من بعض الفئران من كل مجموعة لمراقبة التغيرات في ملف المثيلة ، خاصة قبل وبعد تحريض عوامل OSKM - للتأكد من حدوث التجدد اللاجيني فعليًا
• تخضع بعض المجموعات لاختبارات معرفية وجسدية لاختبار الفرضية القائلة بأن الفئران في مجموعات العلاج لديها عمر بيولوجي أقل ولتحديد أفضل نظام جرعات دون انتظار الوفاة الكاملة في جميع المجموعات (حيث تعيش الفئران وحدها 2.5 سنة ، و إذا كان العلاج ناجحًا ، فقد يزيد هذا المؤشر بشكل ملحوظ للمجموعات التجريبية)
• بالنسبة لمشروع الكائنات المعدلة وراثيًا للحيوانات الأليفة ، قم بإخراج العديد من سلالات الكلاب والقطط المعدلة وراثيًا باستخدام كاسيت OSKM واختبر أوضاعًا مختلفة لتحريض هذه الجينات ، وجمع نفس البيانات الموجودة على الفئران

مسار البحث 2 ("رافعات في السماء"): البحث عن عوامل التراجع اللاجينية الأكثر أمانًا (التي لا تؤدي إلى إزالة التمايز التام)

• ابدأ بدراسات عن عامل Oct4 في المختبر فقط عن طريق قياس التغيرات الجينية (باستخدام ساعة مثيلة Hannum / Horvath) - نظرًا لوجود دليل على أن عامل النسخ هذا فقط يكفي لتجديد شباب اللاجيني
• من الناحية المثالية ، قم بفحص كل عامل من عوامل Yamanaki الـ 24 الأولية في المختبر عن طريق قياس التغيرات الجينية (باستخدام نفس ساعة هينوم / هورفاث مثيلة)
• ثم فحص كل مجموعة من العوامل المحددة على فئران LAKI التي تتقدم في العمر بسرعة عن طريق إنشاء سلالة جديدة معدلة وراثيا لكل تركيبة باستخدام شريط الدوكسيسيكلين
• افحص سلامة هذه العوامل باستخدام التنشيط اليومي المتسق (كما هو الحال في عمل Belmonte مع OSKM). الهدف هو العثور على بقاء أفضل مما أظهرته عوامل OSKM (التي بدأت منها الفئران في الموت بعد 3 أيام متتالية من الاستقراء)
• علاوة على ذلك ، ولأكثر العوامل أمانًا ، اختبر أنظمة الجرعات الجديدة على فئران LAKI من أجل إطالة عمرها بأكثر من 50٪
• مشروع موازي: استخدم الأجسام المضادة بدلاً من العوامل Oct4 ، Sox2 ، c-Myc كما في هذا العمل . إذا نجح هذا النهج ، فلن تكون هناك حاجة إلى التلاعب الجيني على الإطلاق . يكفي إدخال الأجسام المضادة. ابدأ بفئران LAKI ، وتحقق من فئران WT مع مراعاة التغيرات في ساعات المثيلة (هل سينخفض ​​الشيخوخة الحيوية ليس أسوأ من OSKM؟)
• مشروع موازي: للتحقيق في دور البروتينات Piwi و RNAs المتفاعلة مع Piwi كعوامل في قمع الترانزوسونات والتجدد اللاجيني المحتمل ، كما هو الحال في هذه المقالة .
• مشروع موازي: للتحقيق في متغيرات الهستون TH2A و TH2B ، والتي ، وفقًا لهذا العمل ، يمكن أن تحل محل Sox2 و c-Myc ، مما يعني أنها نفسها يمكن أن تحفز رشاوى لا جينية.

مسار البحث 3: مركبة التسليم (الناقل) والبراءات

• يمكن شراء فيروسات كاسيت AAB و OSKM الآن. من الضروري أخذ الفئران البالغة LAKI و WT وإجراء سلسلة من التجارب على (أ) كفاءة إيصال هذه الجينات إلى كائن بالغ ، و (ب) التأثير على ساعات المثيلة والمعلمات البيولوجية من تحريضها. هل ستعيش مثل هذه الفئران لفترة أطول ، حتى لو ابتعدت جينات OSKM عن جميع الخلايا؟ مثل هذه الدراسات ستحتاج أيضا أن تأمر.
• بالنسبة للنهج التكاملية (أي ، مع دمج الجينات الجديدة في الحمض النووي) ، فإن العقبة الرئيسية التي تحول دون استخدام الحيوانات البالغة هي انخفاض درجة الدمج (10 - 50٪ بالنسبة لمتجهي AAV أو ناقلات العدسة) ، وكذلك انخفاض نفاذية حاجز الدم - الدماغ (ومن المرجح أن تكون حرجة من المهم تجديد منطقة ما تحت المهاد). لذلك ، يجب أن يكون هذا أحد المجالات الرئيسية للبحث. من الضروري اختبار ترنسفكأيشن متعددة متسلسلة - هل من الممكن بهذه الطريقة تحقيق توصيل الجينات الضرورية في 75 ٪ على الأقل من الخلايا في جميع الأنسجة؟ نحن بحاجة إلى خوارزمية للحماية من الحث المتكرر في نفس الخلية - إذا دخلت عدة أشرطة مع جينات ، فإننا لا نريد أن يتم حثهم جميعًا.
• طرق التسليم الأخرى: توصيل البروتينات أو mRNA (غير تكاملية ، ولكنها مكلفة). طلب البحث من الشركات المشاركة في تطوير طرق توصيل الجينات. على سبيل المثال ، الجينات الجعران .
• طريقة أخرى: إطلاق الدنا المضاد للأجسام المضادة (طريقة جديدة ، تجريبية ، مكلفة). سيكون من الضروري التشاور مع مطوريها.
• لزيادة فرص الاهتمام بـ Big Pharma باستخدام هذا العلاج - الذي بدونه سيكون من المستحيل إجراء تجارب سريرية تبلغ قيمتها مئات الملايين من الدولارات - تحتاج إلى السعي ليس فقط للحصول على طريقة آمنة وفعالة ، ولكن أيضًا من أجل نهج براءات الاختراع: من الناحية المثالية ، يجب أن يكون شريطًا يحتوي على مجموعة فريدة من العوامل ، يتم تنشيطه بواسطة منشط آمن وخامل وبراءة اختراع (على عكس الدوكسيسيكلين). يمكن تطوير الخرطوشة نفسها (غلاف + محث) بمفردها وشراؤها (مرخصة) بمجرد توفر أنظمة التسليم هذه.

الأسعار ، التواريخ

إليك ما حصلت عليه بالأسعار والشروط:

• مسار البحث 1 (عوامل OSKM في الفئران): 1.5-2 مليون دولار ؛ المدى: 3 سنوات
• مسار البحث 1 (الحيوانات الأليفة): 3-4 مليون دولار ؛ المدة: سنتان
• مسار البحث 2 (أفضل العوامل): 6-8 مليون دولار أمريكي ؛ المدى: 4-5 سنوات
• مسار البحث 3 (سيارة التسليم): 2-3 مليون دولار ؛ المدى: 2-3 سنوات
• الأمن: 3-5 مليون دولار أمريكي. المدى: 2-3 سنوات
• دراسة عن الرئيسيات (اختياري): 2 - 2.5 مليون دولار أمريكي ؛ المدى: 1-2 سنوات
• الرواتب / النفقات العامة / براءات الاختراع / القانونية وغيرها: 1.5-2 مليون دولار في السنة

معالم المشروع الرئيسية:

• قبل عامين من إطلاق الحيوانات الأليفة المعدلة وراثيًا مع جينات OSKM التي يسببها الدوكسيسيكلين
• 3-4 سنوات قبل الحد الأدنى من العلاج للحيوانات الأليفة الكبار (فيروس العدسة مع OSKM أو عوامل أخرى)
• قبل 5-6 سنوات من بدء تجارب الحد الأدنى من العلاج في البشر (مرحلة تقديم طلب IND مع إدارة الأغذية والأدوية FDA)

مدة المشروع من 5-6 سنوات تعني النفقات العامة بمبلغ 7.5-12 مليون دولار أمريكي ، على أساس 1.5-2 مليون دولار أمريكي أعلاه. وبالتالي ، فإن إجمالي مبلغ النفقات قبل مرحلة IND هو: 24-37.5 مليون دولار أمريكي.

إذا وصل المشروع بنجاح إلى مرحلة IND ، فستقوم شركات Big Pharma بتمزيقه بالأذرع والساقين ، والتي ستبدأ بعد ذلك في التجارب السريرية لمثل هذا العلاج (أولاً من تصلب الشرايين أو مرض الزهايمر أو مرض السكري أو غيرها من الأمراض التي تعتمد على العمر ، والتي من الضروري اليوم اختبار الأدوية لإبطاء الشيخوخة ، لذلك لأن الشيخوخة نفسها لم تصنفها منظمة الصحة العالمية بعد كمرض).

الملخص

تبلور مثل هذا المشروع من نادي موسكو للمشترين في رأسي. أو حتى "نادي المنقذين". دعنا نرى ما يحدث. إذا استطعت إيجاد تمويل له ، أعتقد أنه سيكون مطاردة مجيدة. آمل أنه وفقًا لنتائجه ، سيعاني فيروس نقص المناعة البشرية 2.0 من خسائر كبيرة ، وسوف نتمكن من استعادة حياة صحية على مدى عدة عقود لنا ولأحبائنا.