ليس من أجل صورة شخصية: مقايسة مناعية موصلة بالإنزيم باستخدام شريحة جديدة مضمنة في الهاتف الذكي

من أي مكتب في أي مستشفى يصرخ الأطفال وأحيانًا البالغين من وقت لآخر؟ ما الآباء ، خداعنا بوقاحة في الطفولة ، مقارنة مع لدغة البعوض؟ أعتقد أنك خمنت بالفعل أن هذا هو اختبار الدم. الآن أصبح هذا الإجراء أسرع وأقل إيلاما. شيء واحد لم يتغير - أهميته. يلعب التشخيص في الطب الدور الأكثر أهمية في المراحل الأولى من الحرب ضد المرض. بعد كل شيء ، من أجل هزيمة المرض ، يجب أولاً اكتشافه. بعد أن نجت من إجراء أخذ عينات الدم للتحليل ، فقد انطلقت بهدوء في انتظار نتائجها. في هذا الوقت في المختبرات ، يقوم الأشخاص الذين يستخدمون أجهزة معقدة وضخمة ومكلفة للغاية بتحليل دمك ، ومعرفة ما يوجد فيه وبأي كمية. من الجيد وجود مثل هذا المختبر في المستشفى المحلي ، ولكن هذا ليس هو الحال دائمًا. ولكن ماذا لو كان هناك مختبر للجيب ، صغير وغير مكلف ، ولكن في نفس الوقت يحلل العينات بنفس الدقة والكفاءة مثل المختبر العادي؟ يبدو مثل الخيال العلمي ، أليس كذلك؟ إن عبارة "جيب السكر في الدم محلل" في وقتها بدا مستقبلا. اليوم سوف نتعرف على الأبحاث وتنفيذ التكنولوجيا للتحليل الكمي للبروتينات والأحماض الأمينية من خلال نوع جديد من الأجهزة المدمجة. ماذا تتكون هذه المعجزة ، وكيف تعمل وكيف فعالة؟ سوف نتلقى إجابات على هذه الأسئلة وغيرها في تقرير العلماء. دعنا نذهب.

أساس الدراسة

نحن نعيش في عصر التكنولوجيا الرقمية ، والتي يتم تنفيذها بنجاح في مختلف مجالات حياتنا. الدراسات المختبرية (التشخيصية) ليست استثناء. يلاحظ العلماء أن التحليل بالتنقيط الرقمي هو 1000 مرة أكثر دقة من التحليل التقليدي ، ويسمح بإجراء ملايين التحليلات بشكل متوازٍ داخل قطرة واحدة من عينة بحجم مُقاس بـ femtoliters (fl ، 1 fl = 10 ^-15 l).

استخدام التحليل الرقمي مفيد للغاية للكشف عن الأحماض النووية والبروتينات ، وتحليل الخلايا الفردية ، وحتى exosomes.

Exosomes * - حويصلات خارج الخلية (القطر: 30-100 نانومتر) ، والتي تفرزها الخلايا في الفضاء بين الخلايا. تشارك Exosomes في عمل المناعة ، وإفراز البروتين ، إلخ.

في الوقت الحالي ، أشهر أساليب التحليل الرقمي هي dELISA (مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم الرقمي / DIA) و qPCR (تفاعل سلسلة البلمرة الرقمية). تتيح لك هذه التقنيات العمل مع خلايا فردية ، مع الحصول على نتائج دقيقة للغاية لا تتطلب تصحيحًا. حتى وقت قريب ، باستخدام هذه الأساليب ، تم إجراء تحليل كمي ناجح للبروتين و mRNA في خلية واحدة في نفس الوقت.

تُظهر تقنيات مماثلة وإظهار مواهبهم مرة أخرى أن تنفيذ التحليل الموازي ضمن بيئة صغيرة للغاية (عينة) أمر ممكن تمامًا. ومع ذلك ، مثل أي تقنية أخرى ، فإن هذه الأساليب لها عيوب أيضًا. فهي تافهة للغاية - الأبعاد والسعر وتعقيد التصنيع. يذكرنا الباحثون أن التثبيت لمكبر صوت رقمي (سيموا Quanterix) يكلف حوالي 100000 دولار. وليس بمقدور كل عيادة خاصة تحمل هذا المبلغ ، فأنا صامت بالفعل بشأن العيادات الحكومية.

بالطبع ، سيموا هذا الوحش من Quanterix قوي للغاية ، إذا كان مبالغًا فيه. ويستخدم أقراص مع microcells مع 200000 خلية من 40 فلوريدا لكل منهما.


سيموا Quanterix ل

في الوقت نفسه ، يمكن لهذا الجهاز معالجة ما يصل إلى 4 أقراص ELISA من 96 خلية لكل منهما. وبالتالي ، يمكن لجهاز واحد أن ينتج نتائج 66 عينة في غضون ساعة ، يمكن إخضاع كل منها لتحليل 10 plex (على سبيل المثال ، يتم تحليل عينة واحدة لعشرة مؤشرات في كل مرة). الأرقام لا تصدق حقا. لكن مرة أخرى ، السؤال الذي يطرح نفسه هو سعر وأبعاد آلة المعجزة هذه.


الصورة رقم 1

وهنا ، يقترح العلماء تحويل عيونهم نحو أنظمة قطرات ميكروفلويديك. لا يمكن للأنظمة الكلاسيكية من هذا النوع التفاخر بالأداء الهائل لـ Simoa من Quanterix ، ومع ذلك ، يمكن أن تكون بمثابة أساس لجهاز جديد. يمكن لتقنية قطرة ميكروفلويديك المستمرة التدفق تحليل نظريًا لما يصل إلى مليون خلية. ومع ذلك ، في الممارسة العملية ، لم تتحقق هذه المؤشرات بعد لعدة أسباب. أولاً ، الإنتاجية (أقل من 104 قطرات في الثانية) ، عندما يتم إنشاء قطرات بالتتابع (وليس بالتوازي) وتكون أحادية. ثانيا ، يتم الكشف عن مضان كل قطرة من خلال تمريرها واحدة في وقت واحد من خلال بقعة ليزر. وبعبارة أخرى ، كل شيء في خط ، واحد في وقت واحد. تظهر هذه العملية في الصورة 1 أ (الفصل ، الحضانة والتصميم ؛ 3 ساعات لتحليل 10 ⁷ قطرات).

تتمثل المشكلات الرئيسية لتحويل هذه الطريقة إلى تنسيق مضغوط في صعوبة موازاة البصريات للكشف متعدد الألوان عن التألق ، وتعقيد دمج عملية إعداد العينة ، والحاجة إلى أدوات معينة لتوليد تدفقات قطرات يتم التحكم فيها بشكل صارم. ومع ذلك ، لا يعتاد العلماء على الاستسلام في مواجهة الصعوبات ، بغض النظر عن مدى إعجابهم.

Micro-drop Megascale Detector (MD ، كاشف الماكرو) هو خلق أبطالنا اليوم. لا يمكن تنفيذ هذا الجهاز فقط في أي جهاز محمول (جيب) ، ولكنه يفي أيضًا بمعايير التحليل الكمي للمختبرات العادية كاملة الحجم. تظهر العملية في الصورة 1 ب (الفصل ، الحضانة والتصميم ؛ 10 دقائق لتحليل 10 ⁷ قطرات).

لتحقيق ذلك ، وفقا للباحثين ، تم تنفيذ ثلاث مهام رئيسية:

1. بدلاً من توليد قطرة واحدة لكل واحدة ، تم استخدام الجيل المتوازي من قطرات ميكروفلويديك ، ويعمل بشكل أسرع 100 مرة. كما أن إنجازات زملائه العلماء في مجال إنتاج قطرات monodispersed ( رابط لهذه الدراسة ) جعلت من الممكن التخلص من اعتماد monodispersity من قطرات على معدل التدفق. يسمح ذلك باستخدام المضخات التمعجية الرخيصة للغاية التي يمكن دمجها في جهاز محمول (محمول).
2. تم تحقيق القراءة السريعة لمضخة الحبر بسرعة تزيد عن 105 في الثانية (تذكر الحد الأقصى البالغ 104 ، الذي ذكرته أعلاه) بفضل التصور المرتكز على الهاتف المحمول ، والذي هو أسرع 100 مرة من القراءة التقليدية (عندما تتم قراءة قطرات بدوره). في هذه الحالة ، ليست هناك حاجة للبصريات باهظة الثمن ، والتنفيذ في الأجهزة المحمولة المحمولة واضح. تتمثل الميزة الرئيسية لهذا الابتكار في القدرة على التغلب على قيود معدل الإطارات المنخفض للصورة الرقمية وتوفير كشف مضان متعدد الألوان من خلال تعديل العديد من مصادر الإثارة لمصابيح LED أو ثنائيات الليزر بألوان مختلفة بإشارات فريدة غير دورية. يمكن فك تشفير الفيديو للحصول على بيانات مضان قطرة ، والتغلب على حدود معدل إطار الكاميرا. وبالتالي ، فمن الممكن لتحقيق تلك (المذكورة سابقًا) من 1 مليون قطرة في الثانية.
3. وأخيرًا ، دمج وحدة معالجة microbeads (أو microbeads ، كائنات كروية مجهرية) ، مولد قطيرات ، خطوط تأخير لحضانة القطيرات وكاشف مضان. معًا ، يوفر هذا جهازًا رخيصًا وصغيرًا وفعالًا لإدخال مصل (عينة) غير معالج وإخراج البيانات الجزيئية (النتيجة).

كدليل على اختراعهم ، قام العلماء بتنفيذ DIGA متعدد الإرسال باستخدام حبيبات صغيرة ملونة مختلفة تم الحصول عليها من الأصباغ الفلورية. كل لون هو "رمز" اللون للبروتين الذي يستهدفه الجسم المضاد microbead ( 1c ).

أجري تحليل متعدد الإرسال للسيتوكينات GM-CSF و IL6 باستخدام حبيبات الفلورسنت فوق البنفسجية والخضراء ، عندما احتوت القطرات على حبيبة دقيقة ذات خلية مناعية حمراء الفلورسنت. تم استخدام مصل الأبقار كوسيلة للتحليل الكمي ، وكان الحد من تحديد 0.004 بيكوغرام / مل (بيكوغرام لكل ملليلتر ، 1 بيكوغرام = 10 ⁻¹² جم). هذا هو 1000 مرة أكثر دقة من ELISA القياسية ، ويتوافق مع مستوى دقة ELISA الرقمية.

يستغرق 10 دقائق فقط لمعالجة 10 مليون قطرة. في هذه الحالة ، تشمل العملية نفسها توليد وحضانة القطرات ، وكذلك اكتشاف قطرات الفلورسنت لكل عينة.

هيكل الجهاز وعملية التحليل

الصورة رقم 2: هيكل الجهاز MD.

المزيد حول الصورة أعلاه: 2a - مخطط شرائح ، عرض أعلى وأسفل ؛ 2b هي صورة لرقاقة MD تكون فيها جميع قنوات optofluid مرئية ؛ 2c هو صورة مجهرية لعملية تغليف microbeads إلى قطرات يبلغ قطرها 40 ميكرون ؛ 2d هو صورة مجهرية مضان من قطرات بعد خط تأخير. 2e هو تمثيل تخطيطي لمنصة MD (الهاتف المحمول ، 3 مصادر الإضاءة وشريحة MD نفسها).

يمكن أن تسمى المكونات الرئيسية للطب المعالج بمعالج microgranule ، حيث يلتقط الأخير البروتينات المستهدفة من المصل. بعد ذلك ، يتم وضع العلامات على حبيبات مناعية لتضخيمها لاحقًا داخل القطرات. بين كل هذه العملية ، يحدث التنظيف التكراري (عدة مرات). يوجد أيضًا مولد قطيرات ، حيث يتم خلط الحبيبات الدقيقة بطبقة إنزيم ومغلفة في قطرات الماء والزيوت.

بعد ذلك تأتي قناة ميكروفلويديك تمر خلالها القطرات لمدة 3.2 دقائق. هذه القناة ضرورية كتأخير / تباطؤ في العملية ، مما يسمح بتضخيم إشارة الفلورسنت. الجزء الأخير هو كاشف (أو ماسح ضوئي) يعتمد على الهاتف المحمول (الكاميرا) ، حيث يتم الكشف عن مضان قطرات.

يتكون المعالج ذو الحبيبات الدقيقة من غشاء نصف نافذ لشل حركة الحبيبات. يتم تسليم العديد من الكواشف والمخازن غسل إلى حبيبات يجمد. بعد ذلك ، يتم إطلاق الحبيبات لمزيد من التحليل.

الغشاء نفسه مصنوع من البولي. تم حفر مسار محفور 300 مم ² بقطر 3 ميكرون على الغشاء.

في هذه التجربة ، كان هناك مجموعتان من microgranules: (d = 5.4 μm ، ex / em = 470/490 نانومتر ، CFH-5052-2) وظيفية مع الأجسام المضادة لـ GM-CSF (MAB2172) و (d = 4.5 μm ، ex / em = 370/410 نانومتر ، CFP-4041-2) وظيفية مع الأجسام المضادة لـ IL6 (MAB206).

أولاً وقبل كل شيء ، تمر الجزيئات الدقيقة خلال عملية الحضانة مع العينة لمدة ساعة واحدة ، وبعد ذلك يتم التقاطها على الغشاء المذكور أعلاه.

في هذه المرحلة (داخل الغشاء) ، يتم غسل الحبيبات مع 1 مل من المخزن المؤقت T20 بمعدل تدفق قدره 10 مل / ساعة ، المحتضنة مع 0.1 مل من الأجسام المضادة للكشف عن 0.7 نانومتر في المخزن المؤقت T20 لمدة 0.5 ساعة ، ويتم غسلها مرة أخرى في 1 مل من المخزن المؤقت T20 في 10 مل / ساعة ، وبعد ذلك يتم إطلاقها من الغشاء عن طريق تغيير معدل التدفق إلى 6 مل / ساعة.

بعد ذلك ، يتم خلط microbeads صدر مع ركيزة ELISA ومغلفة في قطرات يبلغ قطرها 40 ميكرون. لضمان خلط دقيق للحبيبات والركيزة ولتقليل إشارة الخلفية من الإنزيمات التي تولد إشارة الفلورسنت ، يتم استخدام قناة خاصة بطول 14 ملم.

تم تصميم مولد القطيرات بحيث يكون قطر القطرة مستقلًا عن معدل التدفق. يحتوي هذا الجهاز على 100 فقط من هذه المولدات ، والتي في الإخراج تعطي إنتاجية 100000 قطرة في الثانية.

يتم تغليف كل قطرة إما حبيبة واحدة أو أنها لم تمس. في الوقت نفسه ، يتم تحقيق تركيز معين - 10 قطرات أكثر من الجزيئات الدقيقة (على سبيل المثال ، 20 قطرات - 10 مع حبيبات و 10 بدون حبيبات). هذا يقلل من احتمال وجود حبيبات واحدة تصل إلى 0.5 ٪ في قطرة واحدة.

بعد مولدات القطيرات ، يوجد خط تأخير يشبه اللولب بعرض قناة 1.8 ملم وارتفاع 1.5 ملم. يجب أن يكون خط التأخير طويلاً بما يكفي ، لكن لا يمكنك زيادة حجم الجهاز. لذلك ، تم عمل 4 قطع حلزونية واحدة ، لتمرير تمامًا بمعدل تدفق قدره 67 مل / ساعة ، ستستغرق القطرات 3.2 دقيقة.

من أجل إدخال مثل هذا الجهاز في منصة متنقلة ، كان من الضروري حل بعض المهام المتعلقة بكاميرا الهاتف. يؤدي استخدام الإثارة المعتادة للضوء المستمر إلى حقيقة أن القطرات المتحركة في مجال رؤية الكاميرا يتم تصويرها على هيئة خطوط. يحدد طول هذا الشريط الحد الأدنى للمسافة بين القطرات ، وبالتالي ، يحد بشكل خطير من الإنتاجية.

إذا استخدمنا الإثارة الضوئية بتسلسل عشوائي زائف (في الوقت المناسب) ، فسيسمح لنا ذلك "برؤية" القطرات الفردية. سرعة تعديل الضوء هي 10 أضعاف وقت تعريض الكاميرا. نظرًا لهذا الاختلاف ، تشكل القطرات شرائط ، المسافة بين (أقطار القطر الثلاثة) كافية لتقريرها الفردي. في هذه الحالة ، يمكنك تخطي 120 قناة بالتوازي بالتوازي أمام الكاميرا.

نقطة أخرى مهمة في الكشف والمسح الضوئي هي الإسفار. من أجل إجراء ELISA المتعدد ، هناك حاجة إلى عدة إشارات الفلورسنت المختلفة.لذلك ، تم استخدام 3 مصادر الضوء في وقت واحد ، كل منها لديه الطول الموجي اللازم لإثارة صبغة الفلورسنت معينة. يتكون هذا النظام الثلاثي من ليزر ديود (أزرق ، أخضر) ومصباح واحد (UV).


الصورة رقم 3: عملية "نتائج العينة" (فك تشفير البيانات من كاميرا الهاتف).

لإجراء فك تشفير دقيق للفيديو من كاميرا الهاتف ، كان من الضروري إجراء كشف الارتباط لأنماط التعديل الثلاثة المتوقعة ( m ) ، والتي تتوافق مع كل من مصادر الإضاءة الثلاثة.

وكانت النتيجة متجه ارتباط ( 3a ) ، حيث: k - frames ؛ n = 1: 120 قناة في الجهاز ؛ R ، G ، B - قنوات ملونة من الكاميرا الرقمية ؛ ص ، ز ، ب - لون الإثارة.

تم إنشاء نموذج الحبرية عبر تسلسل أقصى طول (MLS) مع | m | = 63 بت. علاوة على ذلك ، يبلغ كل بت 10 بيكسلات في صورة رقمية ، أي ما مجموعه 63 بتة هي 630 بكسل (1/3 لإطار واسع في عام 1920).

يعد فحص التألق ضروريًا لتحديد ما إذا كانت القطرة تحتوي على حبيبة دقيقة ، إذا كان الأمر كذلك ، لتحديد اللون (جزيء UV أو بروتين أخضر ، أحمر مستهدف). بعد تلقي هذه البيانات ، يجب استخراجها. للقيام بذلك ، ينقسم إطار الفيديو إلى مكونات حمراء وخضراء وزرقاء وفقًا لمستشعرات الكاميرا ( ثلاثية الأبعاد ).

هذا الجهاز يستخدم التكنولوجيا السحابية. تم ذلك لتقليل الحمل على الحديد (أي على الهاتف نفسه). بدلاً من التحكم في سرعة القطر أو الطور ، تم إجراء الحوسبة السحابية لتحديد القطرات ذات الطور أو السرعة غير المعروفة ( 3s ). بعد تحديد المراحل المثلى وسرعة القطرات ، يمكن للمرء تحديد بدقة القمم في فضاء الارتباط cor ^{r و g و b} _{k و n} (x و υ _c و θ _c ) ( 3f و 3 ^g ).

يتم تحميل البيانات التي تم جمعها إلى تطبيق خاص (حتى الآن فقط على نظام التشغيل Android OS) ، والذي يرسلها إلى السحابة للمعالجة باستخدام MATLAB على خادم بعيد. بعد ذلك ، يتم إرجاع البيانات التي تمت معالجتها بالفعل إلى الهاتف الذكي وعرضها على الشاشة.

بعد كل الأعمال التحضيرية والاختبار ، قرر العلماء إجراء "السجال" بمشاركة إنشائها وجهاز Simoa التجاري بالحجم الكامل الحالي.

في مبارزة الاختبار ، استخدمت ثلاثة إصدارات من وسيط العمل: PBS - عازلة فوسفات الصوديوم ، FBS - مصل الأبقار الجنيني ومصل دم الإنسان. كان المؤشر الأكثر أهمية هو حد الكشف (LOD) ، أي الحد الأدنى لمحتوى المادة الحليلة في العينة.


نتائج اختبار رقاقة MD.

أجريت عدة قياسات أحادية الإرسال لـ M-CSF (الصورة A أعلاه) و IL6 (Image B ) في وسط PBS عن طريق قياس التخفيفات التسلسلية من 104 إلى 102 بيكوغرام / مل. في هذا الاختبار ، تم الحصول على حدود اكتشاف جيدة للغاية: LOD = 0.0045 بيكوغرام / مل لـ GM-CSF و LOD = 0.0070 بيكوغرام / مل لـ IL6.

كما تم إجراء قياسات مماثلة في محلول FBS (1: 4). في هذه المرحلة ، تم تقسيم عينة التحليل إلى نصفين بين الجهاز قيد الدراسة و Simoa "الوزن الثقيل" التجاري. ونتيجة لذلك ، أظهر إنشاء العلماء نتائج ممتازة ، والتي لم تكن عملياً أدنى من نتائج Simoa (R2 = 0.95 ، الصورة C أعلاه).

ولكن كان تحليل واحد plex ، وهذا هو ، تحليل مؤشر واحد. الآن كان من الضروري التحقق من كيفية تعامل شريحة MD مع التحليل الموازي للعديد من البروتينات ، أي بالتحليل المزدوج لـ GM-CSF و IL6 في وقت واحد. بادئ ذي بدء ، تمت إضافة كمية معينة من GM-CSF إلى FBS ، وكان تركيز IL6 صفرًا (الصور F و G ). ثم تم عكس ذلك: صفر تركيز GM-CSF وبعض IL6.

في كلتا الحالتين ، لم يختلف حد الكشف كثيرًا عن نتائج التحليل أحادي الاتجاه الذي أجري سابقًا (p> 0.88 لـ GM-CSF و p> 0.90 لـ IL6).

بعد ذلك ، تمت إضافة كمية معينة من كل من GM-CSF و IL6 (الصورة ح) إلى العينة. كانت دقة الكشف ممتازة - R2> 0:99 لـ GM-CSF و R2> 0:99 لـ IL6.

وكان الاختبار الأكثر أهمية تحليل مصل الإنسان. أخذت عينات الدم من 14 شخصا. حدد الباحثون في GM-CSF و IL6 من هذه العينات باستخدام رقاقة MD و Simoa.


النتائج الكمية للمصل البشري GM-CSF و IL6 باستخدام MD و Simoa.

تبين أن نتائج التحليل باستخدام شريحة MD قريبة جدًا من نتائج Simoa (R2 = 0: 96) ، والتي تعد حاليًا أدق المحلل.


مظاهرة الجهاز.

للتعرف أكثر تفصيلاً على الفروق الدقيقة في الدراسة وتفاصيلها ، أوصي بأن تنظر في تقرير المجموعة البحثية والمواد الإضافية إليها.

خاتمة

تلعب السرعة دورًا كبيرًا في الطب. كلما كان التشخيص الدقيق أسرع ، يمكنك البدء في العلاج بشكل أسرع. في بعض الأحيان ، لا يستغرق الأمر حتى أيام ، ولكن الدقائق التي لا يمكن إهدارها.ومع ذلك ، فإن الوقت ليس دائمًا العامل الرئيسي عندما لا يكون لديك أدوات للتشخيص. أبعاد وتعقيد الإنتاج وسعر بعض أجهزة التحليل الدقيق ، وكذلك معدات المختبرات ، بعيدة كل البعد عن الوصول إليها في كل مكان وبعيدة عن الجميع.

لا يعد إنشاء أجهزة مثل شريحة MD فكرة جيدة فحسب ، بل إنها فكرة رائعة ومهمة بشكل لا يصدق. يمكن للمحلل غير المكلف ، الذي يوضح في الوقت نفسه دقة وسرعة عمل ممتازة ، أن يؤثر بشكل كبير على الدواء في جميع أنحاء العالم ، وخاصة في المناطق التي يكون فيها استخدام الأدوات القياسية مستحيلاً. وفقا للعلماء أنفسهم ، فإن تكلفة النموذج الأولي لمثل هذا الجهاز حوالي 500 دولار. في الإنتاج الضخم ، سعر المستهلك هو 5 فقط.

لكل شخص الحق في العلاج ، لكن لأسباب عديدة هذا الحق أبعد ما يكون عن كونه دائمًا ولا يمكن مقارنته في كل مكان بالواقع. البحوث المماثلة والأجهزة المماثلة سوف تساعد على تغيير ذلك.

شكرا لكم على اهتمامكم ، ابقوا فضوليين ولديكم أسبوع عمل جيد ، شباب.

شكرا لك على البقاء معنا. هل تحب مقالاتنا؟ تريد أن ترى المزيد من المواد المثيرة للاهتمام؟ ادعمنا عن طريق تقديم طلب أو التوصية به لأصدقائك ، خصم 30 ٪ لمستخدمي Habr على تناظرية فريدة من خوادم الدخول التي اخترعناها لك: الحقيقة الكاملة حول VPS (KVM) E5-2650 v4 (6 Cores) 10GB DDR4 240GB SSD 1 جيجابت في الثانية من 20 $ أو كيفية تقسيم الخادم؟ (تتوفر خيارات مع RAID1 و RAID10 ، ما يصل إلى 24 مركزًا وما يصل إلى 40 جيجابايت من ذاكرة DDR4).

VPS (KVM) E5-2650 v4 (6 مراكز) 10GB DDR4 240GB SSD بسرعة 1 جيجابت في الثانية حتى الصيف مجانًا عند الدفع لمدة ستة أشهر ، يمكنك طلب هنا .

ديل R730xd 2 مرات أرخص؟لدينا فقط 2 x Intel Dodeca-Core Xeon E5-2650v4 128GB DDR4 6x480GB SSD بسرعة 1 جيجابت في الثانية 100 TV من 249 دولارًا في هولندا والولايات المتحدة الأمريكية! اقرأ عن كيفية بناء البنية التحتية فئة باستخدام خوادم V4 R730xd E5-2650d تكلف 9000 يورو عن بنس واحد؟