2018 अंडरोइंग एजिंग सम्मेलन में जॉन लुईस

ओइसिन बायोटेक्नोलोजी कई कंपनियों में से एक है जो मेथुलेसाह फाउंडेशन और सेन्स रिसर्च फाउंडेशन से संबंधित समर्थकों और शोधकर्ताओं के हमारे समुदाय में दिखाई दिए हैं।

Oisin प्रतिनिधि एक ऐसे प्लेटफ़ॉर्म पर काम कर रहे हैं जो इन कोशिकाओं द्वारा विशिष्ट प्रोटीन की अभिव्यक्ति के आधार पर चुनिंदा रूप से कोशिकाओं को नष्ट कर सकता है। उनके प्रारंभिक लक्ष्य सेन्सेंट कोशिकाएं और कैंसर कोशिकाएं हैं। सबसे पहले, वे एंटीकैंसर थेरेपी को नैदानिक ​​परीक्षणों में लाने जा रहे हैं, क्योंकि सफल कैंसर उपचार कई अन्य उपचारों की तुलना में विनियमित करना आसान है।

यह उन्हें प्रौद्योगिकी का पुन: उपयोग करने की अनुमति देगा, जो कि विभिन्न ऊतकों से कई सिनेसेंट कोशिकाओं को साफ करने में सक्षम, सेनेटोलिटिक थेरेपी के बाद के परीक्षणों की तैयारी कर रहा है। 2018 की शुरुआत में SENS रिसर्च फाउंडेशन और फॉरएवर हेल्दी फाउंडेशन द्वारा आयोजित अंडरोइंग एजिंग सम्मेलन में, ओइसिन बायोटेक्नोलोजी सीएसओ जॉन लुईस ने अपनी तकनीक और नए परिणामों के बारे में बात की।

भाषण

सभी को शुभ संध्या! इस बैठक में आना बहुत अच्छा है। मैं निमंत्रण के लिए ऑब्रे डी ग्रे और माइकल ग्रेव को ईमानदारी से धन्यवाद देता हूं। मैं एक बेहतर अनुक्रम के लिए भी नहीं कह सकता, क्योंकि पिछले स्पीकर ने उन कारणों को उजागर करने का एक शानदार काम किया था, जो सीन्सेंट सेल महत्वपूर्ण हैं और वे इस तरह की समस्या क्यों हैं। मैं एक अकादमिक ऑन्कोलॉजी वैज्ञानिक हूं और उम्र बढ़ने के क्षेत्र में एक शुरुआत हूं, हालांकि मुझे कोशिकाओं को मारने का बहुत अनुभव है, और मैं अब इस बारे में बात करना चाहूंगा: कैसे ओइसिन बायोटेक्नोलोजीज सेनेट्स कोशिकाओं और कैंसर के विनाश के लिए एक बहुत ही चयनात्मक चिकित्सा विकसित करती है।

मैं इस बारे में ज्यादा बात नहीं करूंगा कि सेन्सेंट कोशिकाएं क्या हैं, या वे क्या करती हैं। कुछ शब्दों में, ये शरीर में उत्पन्न होने वाली कोशिकाएं हैं, बाहरी तनावों की प्रतिक्रिया के रूप में - ऑक्सीडेटिव तनाव , जीनोटॉक्सिक तनाव , और वे मुख्य रूप से कैंसर के विकास को रोकते हैं। यह भी ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि जैसे-जैसे कोशिकाएँ सीन्सेंट हो जाती हैं, वे शरीर में प्रचार करने वाले संकेत भी भेजती हैं। मैं दोहराता हूं कि हमारे पास सीन्सेंट कोशिकाओं के सार्वभौमिक मार्कर नहीं हैं। सामान्य विशेषताएं हैं जिन्हें हम उनकी मान्यता में उपयोग कर सकते हैं।

उदाहरण के लिए, लाइसोसोम में सक्रिय एंजाइमों का संचय। हम सक्रिय β-galactosidase दाग सकते हैं। लेकिन वास्तव में यह एक बहुत ही विषम जनसंख्या है, और वे विभिन्न तरीकों से उत्पन्न होती हैं। मैं कनेक्शन पर ध्यान केंद्रित नहीं करना चाहता हूं, मैं सिर्फ इस बात पर जोर देता हूं कि सेल चक्र के पूरा होने की दीक्षा कई कारकों द्वारा नियंत्रित होती है: पी 16 , पी 21 , पी 53 । हमने इसके बारे में सोचा और पूछा: ऐसे सामान्य रास्ते क्या हैं जिनसे हम एक लक्षित चिकित्सा तैयार कर सकते हैं जो इन कोशिकाओं को खत्म करती है? मुझे यह दोहराने की आवश्यकता नहीं है कि उम्र बढ़ने की प्रक्रिया में शामिल होने के दौरान सेन्सेंट कोशिकाएं बहुत विशिष्ट बीमारियां होती हैं, जो उम्र बढ़ने के लक्षण हैं और जिनका इलाज उसी तकनीक से किया जा सकता है।

अंतिम बातचीत में यह महत्वपूर्ण बिंदु था कि पी 16 पूरी कहानी नहीं हो सकती है। लेकिन आपको उन आंकड़ों को देखने की ज़रूरत है जो पिछले कुछ वर्षों में अध्ययन किए गए हैं - और यह वास्तव में मुझे आश्वस्त करता है - कि, निश्चित रूप से, सभी सीन्सेंट कोशिकाएं p16 व्यक्त नहीं कर सकती हैं, लेकिन माउस मॉडल में यह बहुत स्पष्ट है कि यदि आप इसे इस तरह से डिजाइन करते हैं, तो आप चुनिंदा सभी कोशिकाओं को p16 को नष्ट कर सकते हैं, आपको फेनोटाइप में अभूतपूर्व परिवर्तन मिलेगा। मेरे लिए यह बहुत प्रभावशाली था।

उदाहरण के लिए, जॉन वैन डेयर्सन का काम, जिसमें आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहे थे जो p16 प्रमोटर द्वारा संचालित एक आत्मघाती जीन को व्यक्त करते हैं, तथाकथित INK-ATTAC कस्पासे -9 प्रणाली का उपयोग करते हुए, जो उन्हें एक डायमेराइज़र का उपयोग करने के लिए होता है जो कोशिकाओं में एपोप्टोसिस को सक्रिय करता है जो p16 व्यक्त करते हैं। और इन चूहों ने अपने फेनोटाइप में अभूतपूर्व परिवर्तन दिखाया। स्वास्थ्य में महत्वपूर्ण सुधार, औसत जीवन प्रत्याशा में 25% की वृद्धि, 50% कम कैंसर, साथ ही कार्यात्मक परिवर्तन: मोतियाबिंद गठन में कमी, कमजोरी में कमी , और बालों के झड़ने में कमी।

मैं अपने व्याख्यान में एक परिचय के रूप में दिखाऊंगा, कुछ डेटा जो हाल ही में जारी किए गए हैं। उन्होंने मुझे बताया कि यह एक चिकित्सा के रूप में सार्थक होगा - यह पीटर डे कीसर का काम है , जो पिछले साल प्रकाशित हुआ था, p53 और FOXO4 तंत्र का उपयोग करके। वह एक त्वरित उम्र बढ़ने वाले मॉडल का उपयोग करने में सक्षम था, जो चूहे बाल खो देते हैं वे कमजोर हो जाते हैं, और पता चला है कि इन परिवर्तनों के पहले से ही सीनेसेंट कोशिकाओं को हटाने के बाद उन्हें बदल सकते हैं। यह मेरे लिए वास्तव में इस तथ्य की पुष्टि करता है कि सीनेसेंट कोशिकाओं का विनाश विकास का सही मार्ग है।

इसलिए, यह ओइसिन प्रौद्योगिकी की नींव है। एक इंजीनियरिंग समूह के रूप में, हमने सोचा, उस थेरेपी के विकास के दौरान भी जिसे हम किसी विशिष्ट बीमारी के उपचार में उपयोग कर सकते हैं, हमने सामान्य रूप से उम्र बढ़ने के बारे में सोचा, और इस तरह से भविष्य में इसका उपयोग किया जा सकता है क्योंकि हम नैदानिक ​​रूप से प्रभावशीलता की जांच करते हैं। इस प्रकार, हम अपने समय में विकसित आधुनिक पशु मॉडल का उपयोग करके एक समान रणनीति का उपयोग करना चाहते थे। हम कुछ ऐसा विकसित करना चाहते थे जिसमें कम विषाक्तता प्रोफ़ाइल हो जो अच्छी तरह से सहन किया जाता है, और कुछ ऐसा जिसे चक्रीय रूप से दोहराया जा सकता है। ऐसा कुछ जो गैर-प्रतिरक्षात्मक है और जिसका कोई दुष्प्रभाव नहीं है। जाहिर है, कई उम्र बढ़ने के फेनोटाइप्स ऊतक-विशिष्ट हैं, और विभिन्न ऊतकों को चिकित्सा को लक्षित करने की क्षमता एक फायदा होगा।

आज जो मैं आपको बताने जा रहा हूं वह ओइसिन तकनीक है जिसे हमने विकसित किया है। इसे SENSOlytic प्लेटफॉर्म कहा जाता है। यह एक लिपिड नैनोपार्टिकल प्लेटफॉर्म (LNP) है जिसमें एक गैर-पूर्णांक डीएनए प्लास्मिड होता है । यह एक रासायनिक डिमरज़र द्वारा सक्रिय होने के लिए डिज़ाइन किया गया है जो बहुत तेज़ और अपरिवर्तनीय एपोप्टोटिक प्रतिक्रिया शुरू करता है। शायद इसका सबसे महत्वपूर्ण हिस्सा दवा वितरण प्रणाली है - महत्वपूर्ण विषाक्तता के बिना विभिन्न ऊतकों को व्यवस्थित रूप से प्लास्मिड डीएनए को वितरित करने की क्षमता। ओइसिन ने एक बहुउद्देशीय प्लास्मिड-आधारित तकनीक विकसित की है, और हस्तक्षेप आरएनए या मैसेंजर आरएनए के विपरीत, प्लास्मिड को एलिगेंटली केवल तभी सक्रिय करने के लिए डिज़ाइन किया जा सकता है जब कोई विशिष्ट मार्ग, जैसे कि पी 16, पी 21, या 53, सक्रिय हो। लेकिन उन्हें एन्हांसर या रिप्रेसर्स के साथ भी डिज़ाइन किया जा सकता है और विशिष्ट ऊतकों या बीमारियों को लक्षित कर सकते हैं। हमने एक प्रणाली और डिजाइन की लाइब्रेरी बनाई है जो विभिन्न स्थितियों में सक्रिय हैं। उनमें से दो, जो आज मैं आपको दिखाऊंगा, आत्मघाती जीन सहित p16 और p53 प्रमोटर के संस्करण हैं।

हमने प्लास्मिड्स का एक पुस्तकालय बनाया है, जो मूल रूप से iCas9- प्रेरित आत्मघाती जीन से जुड़ा एक विशिष्ट चयनात्मक प्रमोटर है, जिसे फिर रासायनिक डिमेराइज़र का उपयोग करके शामिल या मंद कर दिया जाता है। आप में से कई लोगों ने इसे पहले भी देखा होगा, लेकिन iCas9 एक संशोधित केसस्पेस है, इसलिए इसे काट दिया गया है, समावेश डोमेन को हटा दिया गया है और इसे FKBP डिमराइजेशन डोमेन के साथ बदल दिया गया है। ये क्षेत्र AP20187 रासायनिक डाइमराइज़र या इसके नैदानिक ​​एनालॉग AP1903 के साथ बहुत दृढ़ता से बातचीत करते हैं, जो सुरक्षित है, जैसा कि द्वितीय चरण के नैदानिक ​​परीक्षणों के दौरान दिखाया गया था। इस प्रणाली में वास्तव में अच्छा क्या है कि आप केवल हमारे मामले में p16 या p53 की सक्रिय अभिव्यक्ति के साथ कोशिकाओं में अपने प्लास्मिड के जीन को अस्थायी रूप से व्यक्त करते हैं। और कुछ भी नहीं होता है जब तक आप एक डिमराइज़र नहीं जोड़ते हैं। कम आणविक भार डिमराइज़र बहुत अच्छी तरह से सहन किया जाता है, कुछ मिनटों के भीतर सभी ऊतकों को संतृप्त करता है और एक अपरिवर्तनीय एपोप्ट्रेड प्रतिक्रिया का कारण बनता है। iCas9 इन स्थितियों के तहत मंद हो जाता है, स्व-क्लीवेज, एपोप्टोसोम गठन को सक्रिय करता है और 2 से 3 घंटे के भीतर बहुत तेजी से कोशिका मृत्यु का कारण बनता है। सेल इसका विरोध नहीं कर सकते। वे इसे विकसित या अन्यथा विरोध नहीं कर सकते।

हमारे इन विट्रो अध्ययनों में से कुछ ने प्लेसेंटल म्योफिब्रोब्लास्ट सेल लाइन IMR-90 का उपयोग किया। इस मामले में, हमने iCas9 का उपयोग करके 10 डिग्री के विकिरण और ट्रांसफ़ेक्ट कोशिकाओं का उपयोग करके सीनेस को प्रेरित किया। iCas9, कस्पासे -9 से थोड़ा कम है और कास्पेज़ -9 के एंटीबॉडी के साथ इसका पता लगाया जा सकता है। कोशिकाओं में जो विकिरणित नहीं थे, iCas9 की कोई अभिव्यक्ति नहीं थी। ऐसे मामलों में जहां कोशिकाएं p16 को व्यक्त करके सीसेन्ट हो जाती हैं, iCas9 इंडक्शन शुरू होता है, और जब हम इन कोशिकाओं में थोड़ा डिमेरिसर डालते हैं, तो यह गायब हो जाता है। इन कोशिकाओं से संस्कृति बहुत जल्दी साफ हो जाती है। फिर, जब हम इन कोशिकाओं को मारने की क्षमता को देखते हैं, तो हम व्यवहार्यता परीक्षणों में देखते हैं कि प्रत्येक कोशिका जो एक प्लास्मिड के साथ सफलतापूर्वक ट्रांसफ़ेक्ट हो जाती है। हमने अन्य प्रयोग किए। मैं सिर्फ एक उदाहरण दिखा रहा हूं जिसमें हम फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करते हैं , और हम पुष्टि करते हैं कि हम इन कोशिकाओं में एपोप्टोसिस का कारण बन रहे हैं।

इस प्रकार, हमारे पास एक प्लास्मिड है जो p16 को व्यक्त करने वाली कोशिकाओं के लिए बहुत ही चयनात्मक है। हम एक डिमेरिसर जोड़कर उन्हें बहुत जल्दी मार सकते हैं। सवाल यह है कि हम इसे एक थेरेपी में कैसे बदलेंगे जो मनुष्यों में काम करती है। एक वितरण तंत्र की आवश्यकता है, बहुत कुशल और सुरक्षित। हमने लिपिड नैनोकणों का उपयोग करने का निर्णय लिया। लिपिड नैनोपार्टिकल्स का उपयोग कई वर्षों से किया जा रहा है, और मैं कहूंगा कि कई वादे और निवेश हुए हैं, और बहुत कम सफलताएं मिली हैं। बोस्टन में Alnylam Pharmaceuticals ने हाल ही में एक mRNA तैयारी के साथ एक सफल चरण III परीक्षण किया, और समस्या यह है कि लिपिड नैनोपार्टिकल्स आमतौर पर यकृत में जमा होते हैं और कोशिकाओं को उनके न्यूक्लिक एसिड वितरण तंत्र एक सकारात्मक चार्ज का उपयोग करते हैं। यह एक बहुत ही सरल तकनीक है। उन्होंने सकारात्मक चार्ज के साथ लिपिड बनाए। यदि आप एक सकारात्मक चार्ज का उपयोग करते हैं, तो वे बहुत आसानी से झिल्ली में छेद करते हैं , और आप कुशलता से कोशिकाओं में जमा कर सकते हैं, सिवाय इसके कि वे बहुत विषाक्त हैं। इस प्रकार, उनके पास बहुत कम सुरक्षित खुराक है।

इसके जवाब में, कई कंपनियों ने तथाकथित सशर्त रूप से cationic lipid विकसित किया है। यह लिपिड , आमतौर पर रक्तप्रवाह में तटस्थ होता है, एंडोसोम में प्रवेश करता है और एक अम्लीय वातावरण में cationic हो जाता है। वे चल रहे कार्यक्रमों का विषय हैं जो लिपिड नैनोकणों के नैदानिक ​​परीक्षणों से गुजरते हैं। वे काम करते हैं, लेकिन वे अभी भी बहुत विषाक्त हैं। एक आदर्श वितरण प्रणाली वह है जो न्यूक्लिक एसिड के सेल वितरण के लिए एक वैकल्पिक तंत्र के साथ तटस्थ लिपिड का उपयोग कर सकती है। मैं आपको थोड़ा सा बताने जा रहा हूं कि हम उनके पास कैसे आए। यदि आपके पास एक लिपिड नैनोपार्टिकल है, और इसे सेल के अंदर लाने की आवश्यकता है, तो इसे अपने सभी सुरक्षा के साथ प्लाज्मा झिल्ली से गुजरना होगा। वायरस इस समस्या को हल करने में लाखों वर्षों में विकसित हुए हैं, और कई फ्यूजोजेनिक प्रोटीन विकसित किए हैं । ये प्रोटीन सुंदर, विशाल और सुरुचिपूर्ण होते हैं, और जिस तरह से वे झिल्ली को एक साथ जोड़ते हैं, छिद्र बनाते हैं और मिक्स लिपिड वास्तव में शानदार होते हैं, लेकिन आप उन्हें लिपिड नैनोपार्टिकल से जोड़ नहीं सकते, क्योंकि वे विशाल सक्रिय केंद्र और उच्च इम्युनोजेनसिटी वाले बड़े प्रोटीन हैं।

सौभाग्य से, एक कनाडाई वैज्ञानिक है जिन्होंने अपने पूरे जीवन में इन फ्यूज़ोजेनिक ऑर्थोर्विरस का अध्ययन किया है, और पाया कि वे कोशिकाओं में प्रवेश करने के लिए फ्यूज़ोजेनिक प्रोटीन का उपयोग नहीं करते हैं, लेकिन जैसे ही वे कोशिकाओं में प्रवेश करते हैं, वे चारों ओर सभी कोशिकाओं को जल्दी से विलय करने का कारण बनते हैं। उन्होंने अपने करियर को संलयन से संबंधित संलयन संबंधी प्रोटीन के इस वर्ग की विशेषता के रूप में बिताया, जो अन्य विषाणुओं द्वारा व्यक्त की गई सबसे छोटी फुंसोजेनिक प्रोटीन की तुलना में छोटे के दो क्रम हैं, लेकिन कोशिकाओं के संलयन को शुरू करने के लिए पर्याप्त हैं और सबसे महत्वपूर्ण, लिपिड नैनोकणों और कोशिकाओं को।

जब इन प्रोटीनों को तटस्थ लिपिड नैनोकणों के आधार पर एक प्लेटफ़ॉर्म में शामिल किया जाता है, तो आप पाएंगे कि न्यूट्रल लिपिड अकेले लोड देने में बेहद खराब हैं। हमारे उदाहरण में, हम कैंसर कोशिकाओं के खिलाफ mCherry प्लास्मिड का उपयोग करते हैं, और इसलिए फ्यूजोजेनिक प्रोटीन के बिना बिल्कुल भी डिलीवरी नहीं होती है, और उनके साथ हमें एक शानदार डिलीवरी मिलती है। इस प्रकार, वे एक तटस्थ लिपिड कण की डिलीवरी को 80-350 गुना बढ़ाते हैं, और वे विवो में अच्छी तरह से सहन करते हैं। ल्यूसिफरेज के साथ एक प्रयोग में , हम एमआरएनए को पूंछ की नस में ल्यूसिफरेज व्यक्त करते हुए इंजेक्ट करते हैं। हमें पूरे शरीर में ल्यूसिफरेज अभिव्यक्ति मिलती है। हम फेफड़ों और यकृत में एक संचय को नोटिस करते हैं, लेकिन हमें पूरे शरीर में त्वचा और कोमल ऊतकों सहित कई ऊतकों में अच्छी अभिव्यक्ति मिलती है।

हम अपने प्लेटफॉर्म का उपयोग सेन्सेंट कोशिकाओं के खिलाफ पेलोड देने के लिए करते हैं। प्लेटफ़ॉर्म को फ़ुसोजेनिक्स कहा जाता है। यह एक तटस्थ लिपिड नैनोपार्टिकल का उपयोग करता है, जो गैर विषैले और अच्छी तरह से सहन किया जाता है। और वह सेल में प्रवेश करने के लिए इन फ्यूजोजेनिक प्रोटीन का उपयोग करती है। मैं सभी छोटी चीजों में नहीं जाना चाहता हूं। इन प्रोटीनों के प्रति एंटीबॉडी बनाने में हमें तीन साल लग गए, वे वास्तव में गैर-प्रतिरक्षात्मक हैं। इसका कारण यह है कि उनमें से अधिकांश ट्रांसएम्ब्रेनर डोमेन हैं। वे लिपोफिलिक हैं , इसलिए वे अपने चारों ओर लिपिड पैक करते हैं, और वे प्रतिरक्षात्मक नहीं हैं। हमने इन फ्यूजोजेनिक प्रोटीन को बेहतर बनाने के लिए बहुत समय बिताया। मैं सभी छोटी चीज़ों में तल्लीन नहीं हो रहा हूं, लेकिन अब हमारे पास बड़ी मात्रा में और औद्योगिक रूप से उनके उत्पादन के लिए एक मंच है, और हम उन्हें उपयोग के लिए अनुरोध पर भेज सकते हैं।

मुझे आपको एक प्रयोग में प्राप्त डेटा दिखाते हैं - जिसमें उन्होंने सक्रिय p16 कास्पेज़ -9 लिया और इसे चूहों में पेश किया। इस मामले में, हमने 16 चूहों, 80 सप्ताह के एक बुजुर्ग माउस समूह के साथ एक प्रयोग किया। हमने उन्हें तीन समूहों में विभाजित किया, हमने उन्हें एक एलपीआर के बिना, या दो खुराक, 5 और 10 मिलीग्राम / किग्रा - और 10 मिलीग्राम / किग्रा के बिना नियंत्रण एलएनपी की शुरुआत की - यह एक बड़ी खुराक है। हमने पूंछ की नस में इंजेक्शन लगाकर एक बार इन जानवरों का इलाज किया। हमने 96 घंटे तक इंतजार किया, और फिर एक डायमेराइज़र भी पेश किया, वह भी अंतःशिरा रूप से। फिर हमने दो और दिन इंतजार किया, ऊतक, रक्त एकत्र किया, संवेदनशील आरटी-पीसीआर का प्रदर्शन किया, और इसे कई जीनों के साथ नियंत्रित किया। हमें विभिन्न ऊतकों में p16 अभिव्यक्ति में एक ठोस खुराक पर निर्भर कमी प्राप्त हुई।

मैं आपको कुछ छवियों को दिखाने जा रहा हूं जहां हम चूहों में β-गैल धुंधला होने का अनुकूलन करने में बहुत समय बिताते हैं। ये हमारे पास सबसे अच्छी छवियां हैं, लेकिन कई ऊतकों में हमें gal-galactosidase अभिव्यक्ति में खुराक पर निर्भर कमी मिली। बहुत उत्साहजनक जानकारी। बेशक, प्रयोगशाला में काम करना अच्छा है, लेकिन अगर हम इसे लोगों में अनुवाद करने जा रहे हैं, तो कई चीजें हैं जिन्हें स्पष्ट करने की आवश्यकता है। विष विज्ञान अत्यंत महत्वपूर्ण है। यह एक दवा के लिए महत्वपूर्ण है जिसे आप चक्रवात के बारे में सुनिश्चित करने के लिए करते हैं कि आपका शरीर एंटीबॉडी को निष्क्रिय नहीं करता है। इस प्रकार, हमने बार-बार खुराक पर कई अध्ययन किए, और हमने किसी भी एंटीबॉडी को रिकॉर्ड नहीं किया, इसलिए हम प्रभावशीलता में कमी के बिना इसे दोहराया खुराक में दे सकते हैं। CARPA वह है जो मैंने हाल ही में सीखा है, एक पूरक सक्रिय रूप से सक्रिय छद्म एलर्जी , एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया जो कि डोपिल जैसे नैनोपार्टिकल थेरेपी प्राप्त करने वाले कई रोगियों में हो सकती है । हमने सभी विश्लेषणों को चलाया, और उनके पास डॉक्सिल की तुलना में कम प्रोफ़ाइल है, इसलिए वे बहुत अच्छी तरह से सहन कर रहे हैं।

मुझे यह कहते हुए खुशी हो रही है कि हमने प्राइमेट्स के साथ कई पायलट अध्ययन किए, हमने उन्हें दस गुना अधिकतम मानव खुराक दिलाई, और यह बहुत अच्छी तरह से सहन किया गया। इन बंदरों को वास्तव में, p53 और p16, दोनों अलग-अलग और संयोजन में और एक डिमराइज़र से उपचार प्राप्त हुआ, इसलिए हम अच्छे आंकड़ों पर भरोसा कर रहे हैं। अब हम उन पर काम कर रहे हैं।

इन कणों की सहनशीलता बहुत महत्वपूर्ण है। मैं इस स्लाइड को दिखा रहा हूं क्योंकि यह लिपिड नैनोकणों के नैदानिक ​​परीक्षणों में किए गए सभी प्रयासों को दर्शाता है और वे असफल क्यों हुए। यदि आप पहले तीन कार्यक्रमों को देखते हैं, तो वे दस साल पहले cationic liposomes और lipid नैनोकणों का उपयोग कर वादा कर रहे थे। आप देख सकते हैं कि उनकी अधिकतम सहन की गई खुराक 1 मिलीग्राम / किग्रा से कम है, और ये कार्यक्रम यकृत विषाक्तता के कारण सभी विफल हो गए हैं। दूसरी पीढ़ी, सशर्त रूप से cationic लिपिड, उन्हें अधिक या कम हद तक स्थानांतरित कर दिया गया था, और इनमें से कुछ कार्यक्रम सफल रहे थे और दवाओं के अनुमोदन के लिए नेतृत्व करेंगे, लेकिन सभी लक्ष्य जिगर हैं। जैसा कि लिपिड नैनोपार्टिकल्स लीवर में जमा हो जाते हैं, अगर आप न्यूट्रल लिपिड कंपोजिशन का इस्तेमाल नहीं कर रहे हैं तो आपको डोज सीमित हो जाएगा। तब आप हमारी तरह एक तटस्थ लिपिड रचना का उपयोग कर काम देख सकते हैं, और वे एक अध्ययन में अधिकतम सहनशील खुराक नहीं पा सके। गैर-मानव प्राइमेट के हमारे अध्ययन के आधार पर, हम उम्मीद करते हैं कि हमारे कण समान रूप से सहनीय होंगे।

वर्तमान में हम विभिन्न निर्माणों का मूल्यांकन कर रहे हैं, जो यह पता लगाने के लिए कि मनुष्यों पर सबसे अच्छा किसका उपयोग किया जाता है, और हमने स्पष्ट रूप से इस सम्मेलन में इस बारे में बात की - जैव चिकित्सा के निर्माण जो नैदानिक ​​परीक्षणों के अच्छे संकेतक हैं, साथ ही साथ प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए पशु मॉडल में भी हैं। हम वास्तव में किसी भी वैज्ञानिक के साथ बात करना चाहते हैं जिनके पास एक अच्छा बायोमार्कर है। हमारे पास चूहों के समूह हैं जिनमें हम इन चूहों के जीवनकाल और स्वास्थ्य को देखते हैं। हम नैदानिक ​​चरण में जाने के बारे में सोच रहे हैं जब हमें जीएमपी और जीएलपी विषाक्तता विश्लेषण मिलता है ।

इसलिए, मैं कैंसर पर स्विच करने जा रहा हूं, क्योंकि यह क्लिनिक का हमारा मुख्य तरीका है। मेरा मुख्य काम प्रोस्टेट कैंसर का अध्ययन कर रहा है । एक चीज जिसने मुझे उम्र बढ़ने और कैंसर के बीच संबंध के साथ वास्तव में साज़िश की है, वह है p53 मार्ग की सक्रियता। P53 जीन कैंसर में सबसे उत्परिवर्तित जीन है, और कई प्रकार के कैंसर हैं जिनका p53 में उच्च उत्परिवर्तन भार है। मैं प्रोस्टेट लेता हूं क्योंकि इसकी दरें कम हैं, औसतन वे 10% बनाते हैं, अधिकांश प्रोस्टेट कैंसर कम-गतिशीलता हैं।जैसे ही आपको मेटास्टैटिक बीमारी होती है , यह उत्परिवर्तन दर 50% से अधिक हो जाती है। इसलिए, यह कैंसर के उपचार में एक अच्छा लक्ष्य है। हालाँकि p53 प्रोटीन को अभी तक कैंसर चिकित्सा में लक्षित नहीं किया गया है, मेरा मानना ​​है कि वे बहुत आशाजनक हैं। P53 में, आप दो प्रकार के म्यूटेशन प्राप्त कर सकते हैं। सेल प्रतिकृति या उत्परिवर्तन के दौरान, वे नुकसान को ठीक करने या एपोप्टोसिस से गुजरने के लिए p53 को सक्रिय करते हैं। इसलिए, कोशिकाएँ या तो उत्परिवर्तित हो जाती हैं या इसे बाईपास करने के लिए p53 से छुटकारा पाती हैं। नतीजतन, वास्तविक सक्रियण पथ बहुत विनियमित होते हैं। तो क्या इस सक्रियण का उपयोग कैंसर कोशिकाओं को मारने के लिए किया जा सकता है?

in vitro , , in vivo , . , . p53, iCas9, . . NOD/SCID . 500 ³ . , , . , 90-95% 48 – , , , , .

असली प्रमाण प्रणालीगत इंजेक्शन बनाने की क्षमता है, और हमने ये अध्ययन किए। यह इस समूह में चार चूहों का एक उदाहरण है। हमने इन बहुत बड़े ट्यूमर को विकसित किया, उन्हें 500 मिमी ^{3 के} आकार तक बढ़ा दिया । इस मामले में, हम एलएनपी के चार दैनिक इंजेक्शन को पूंछ की नस में बनाते हैं, और पांचवें दिन हम उन्हें डिमाइज़र की एक खुराक को व्यवस्थित रूप से देते हैं। फिर, हमने उल्लेखनीय परिणाम देखे: केवल दो दिनों में 50-98% की कमी। इससे इन जानवरों में एक इंजेक्शन के बाद उत्तरजीविता में उल्लेखनीय वृद्धि हुई। औसतन, प्रति समूह छह चूहों में, ट्यूमर की मात्रा लगभग 70% कम हो जाती है।

एक चीज जो बहुत महत्वपूर्ण है: प्राथमिक ट्यूमर ज्यादातर मामलों में रोगियों को नहीं मारते हैं। यह एक मेटास्टेटिक बीमारी है, इसलिए हमें यह जानने में बहुत दिलचस्पी है कि क्या हम मेटास्टेटिक कैंसर का इलाज कर सकते हैं। जाहिर है, हम ऐसे मामलों को पहले नैदानिक ​​परीक्षणों में लेंगे। इस प्रकार, हमने मेटास्टेटिक रोग को नियंत्रित करने के लिए एलएनपी की क्षमता का अध्ययन करने वाले कई मॉडल बनाए हैं, इस मामले में हमारे पास प्रोस्टेट कैंसर के प्रणालीगत मेटास्टेसिस का एक मॉडल और इम्युनोकोम्पेटेंट मेलेनोमा का एक मॉडल है । दोनों मामलों में, पुन: प्रयोज्य मोड में, हम इस बीमारी को प्रभावी ढंग से नियंत्रित करने में सक्षम थे।

हम सही रास्ते पर हैं। स्पष्ट रूप से, ओइसिन का आशाजनक लक्ष्य ऐसे एजेंट विकसित करना है जो सीन्सेंट कोशिकाओं को मारते हैं। लेकिन मुझे यकीन है कि अल्पावधि में यह बहुत महत्वपूर्ण है, न केवल नैनोपार्टिकल तकनीक के लिए, बल्कि पूरे मंच के लिए, क्लिनिक में अपनी सुरक्षा और प्रभावशीलता दिखाने के लिए। इसलिए, हमने कैंसर के इलाज के लिए पहले चरण I / चरण IIb के नैदानिक ​​परीक्षण विकसित किए हैं, और अब हम GLP के विष विज्ञान का परीक्षण करने की तैयारी कर रहे हैं, जो इन अध्ययनों की सुविधा प्रदान करेगा। हमें 2019 की शुरुआत में प्रति व्यक्ति सीआई की उम्मीद है। हम इस प्रौद्योगिकी के उपयोग में तेजी लाने के लिए प्रसन्न हैं। मैं एक महत्वपूर्ण बात का भी उल्लेख करूंगा: कई प्रकार के कैंसर हैं जिनमें यह काम कर सकता है। कनाडा में, हम चरण I परीक्षणों का संचालन सभी प्रकार के कैंसर के साथ कर सकते हैं, मुख्य रूप से कोलोरेक्टल, प्रोस्टेट, फेफड़े, और अन्य। हम उपचार में सबसे बड़ी सफलता और सबसे महत्वपूर्ण कैंसर की तलाश करेंगे,इस समूह का विस्तार करने में सक्षम होने के लिए और फिर पूरा चरण II।