为什么我们对恐惧感到麻木:5-羟色胺对运动的影响



“运动就是生命,”屋顶说着离开了。 这个笑话颇具“胡须”,但像任何一个笑话一样,它也有一定道理。 确实,地球上的大多数动物确实具有移动的能力。 在我们的文化中,甚至有许多与动物及其活动相关的隐喻,标语和转折:快如猎豹; 像乌龟一样慢 优美,如母鹿等 在任何生物中,运动(即运动)及其各个方面都受某些身体系统的控制,从肌肉骨骼系统到中枢神经系统。 但是有些运动以前是科学家无法与任何特定的调节器联系在一起的。 这些包括从恐惧中消失。 哥伦比亚大学的一组研究人员发现,我们所有人都熟悉的5-羟色胺是造成“麻木”的原因。 科学家是如何得出这个结论的?果蝇为什么要参加实验?发现了哪些细节? 我们从研究小组的报告中了解到这一点。 走吧

学习基础


再次,果蝇的果实,或果蝇(Drosophila melanogaster)成为了研究的主要特征。 这是由于这样的事实,即这种看似不起眼的生物具有许多独特的能力,可以说,科学家和研究人员非常赞赏。

为了不使文本过于冗长,在扰流板下方隐藏了一个关于果蝇的实况调查小段(用于前面的文章之一):
昆虫学

在分析报告之前,让我们更好地了解主要角色。



果蝇果实是一种双翅昆虫,其大小不超过2.5毫米(雌性中,雄性较小)。 我们中的许多人都是第一手熟悉这些昆虫的人。 夏天到了,我们买水果和蔬菜,将它们放在公共场所的某个地方,过一会儿,请注意这些小动物是如何选择我们的购买的。 如果您不重视这一点,那么几天后,您将在厨房里有一支全军,能够占领较小的国家。 好的,这很夸张,但实际上有很多(我从我自己的经验中知道)。 对于果蝇的发展,并不需要很多东西:一个相当温暖的环境和食物的存在,而食物通常可以作为产卵的地方。 顾名思义,果蝇以蔬菜和水果(在野外为树液)为食。

果蝇的生命周期是相当标准的:一个卵(24小时)-幼虫(5天)-pa(5天)-一个成年个体。 在最有利的环境条件下(温度25°C),该周期大约需要10天。 也就是说,当您从商店购买水果时,几天后便出现了苍蝇,您知道-它们的幼虫(甚至是鸡蛋)已经在产品上了。 因此,在进食前洗净水果。


果蝇的成虫周期。

如您所见,本体形成周期(从卵发育为成虫)不需要花费这么短的时间,但是果蝇通过产卵的数量补偿了这段时间内失去后代的可能性。 雌性一生中大约躺着400只。同时,在成虫周期结束后12小时,她准备进行繁殖。

假设果蝇科学家不仅对本体发育感兴趣,而且像许多昆虫一样,对其运动和视觉方法也很感兴趣,这是正确的。 果蝇的翅膀每秒可闪烁约250次。 如果您发现很难估计这是多少,只需挥动双手,看看您进行了多少这样的动作。 为了进行比较,蜂鸟(较小的物种)大约打了100次。 果蝇也已成为遗传学家的一大兴趣。 果蝇基因组的独特结构特征使其成为研究人类疾病的理想实验(Parkinson,Alzheimer)。 果蝇还有助于研究人体免疫系统,癌症,糖尿病等。

如您所见,这个令人讨厌的小动物以其自己的方式具有独特性,并为研究人员提供了巨大的潜力。

果蝇也是研究运动的理想选择。 像其他许多昆虫一样,果蝇的动作范围也相当广泛,视情况而定。 她在困难的表面上移动并不困难,包括倒置在天花板上。 为了使这种平衡草图成为可能,昆虫必须同时调节运动速度和其他运动学参数。

在昆虫和有肢体的脊椎动物之间的运动方面,有共同的特征。 这些功能之一是使用多关节腿/脚。

果蝇通过腹神经链(以下简称VNC)中的神经链控制其复杂步态,腹神经链是椎体脊髓的功能类似物。 VNC包括三对胸神经绒毛(T1,T2和T3),它们协调三对相应的腿部的运动。 VNC接收来自大脑的命令,并通过运动神经元将运动指令传输到周围的肌肉。

传递本体感受*和触觉信息的感觉神经元沿着相同的纤维路径将轴突从附肢投射到VNC中,并沿着神经纤维*爪分开( 1A )。
本体感觉* -自己的肌肉的感觉,即对身体各部分相对于彼此以及相对于周围空间的位置的意识。
Neuropil * -神经细胞过程的积累。


图片编号1:果蝇中枢神经系统中的神经调节剂。

一个奇怪且有点令人毛骨悚然的事实-VNC甚至可以在断头的动物中执行四肢的协调运动。

因此,总结以前的研究数据,可以假定是VNC包含神经网络,该神经网络可以协调苍蝇每条腿的每个关节的弯曲和伸展,并可以协调步态本身。

先前已经发现,对于快速和稳定的运动,来自爪子的感觉数据是非常必要的。 但是,不能争辩说这是唯一的调节剂,因为即使去除了本体感受受体或四肢受损,协调的步行也不会受到干扰。 因此,还有其他东西可以调节它。 但是呢

科学家认为,这些隐藏的调节剂可能是神经调节系统,包括多巴胺,去甲肾上腺素和5-羟色胺。
神经递质* -一种物质,神经细胞的电化学冲动在神经元之间传递,以及从神经元到肌肉组织或腺细胞的冲动。
多巴胺*是一种神经递质,通常与满足感和爱感以及认知功能相关(将注意力从认知活动的一个阶段转移到另一阶段)。 帕金森氏病是指与多巴胺能缺乏症有关的人类疾病。
去甲肾上腺素*是一种通常与清醒相关的神经递质。 在人体中,它参与血压和周围血管阻力的调节。 当身体处于危险之中时,去甲肾上腺素也参与“命中或逃跑”反应。
血清素*是一种抑制性神经递质,即 多巴胺对映体(激活神经递质)。 5-羟色胺引起平滑肌收缩并促进运动功能,调节血管紧张度。 另外,血清素通常被称为“幸福荷尔蒙”,这是一种粗略且不准确的说法。
值得注意的是,相同的神经调节系统在不同的动物物种中执行非常相似的功能。 例如,5-羟色胺减慢了七,鳗,猫和蝗虫的运动节奏(我见过的最不寻常的三重奏)。 对果蝇的研究表明,它们的单胺类神经递质*还可以调节多种行为。
单胺神经递质*是具有一个氨基的神经递质和神经调节剂,其通过两个碳原子的链与芳环(-CH2-CH2-)连接。
发现5-羟色胺会影响步行速度的下降,调节睡眠,攻击性和焦虑相关的运动行为。 相反,多巴胺与多动症有关。 另一个有趣的神经递质是章鱼胺,已证明它会影响饥饿引起的机能亢进。 在没有章鱼胺的情况下,动物的运动更加缓慢。

如我们所见,果蝇在墙壁或天花板上的简单爬行与许多复杂的神经化学过程有关,科学家决定对此进行更详细的研究。

研究成果


为了鉴定可在调节步行行为中发挥作用的神经调节神经元,科学家在启动子的控制下使用了带有Gal4的荧光报告基因*的表达*为每个神经调节系统编码关键的合成酶:

  • 色氨酸(5-HT)的色氨酸羟化酶(Trh);
  • 多巴胺的酪氨酸羟化酶(TH或ple);
  • 酪胺脱羧酶2(Tdc2)用于章鱼胺和酪胺。
记者*是与其他基因的调控序列连接的基因,用于研究细胞培养物中基因的表现。
启动子*是在转录起始过程(RNA合成,其中DNA充当模板)中起重要作用的DNA核苷酸序列。
所有这些介体均在VNC和脑细胞中均表现出广泛的表达。

科学家进一步检查了爪神经元是否被*神经调节性VNC或源自大脑的降级神经元( 1A支配
神经* -为器官和组织提供神经,以确保它们与中枢神经系统的联系。
实验表明,神经脚的神经调节神经几乎全部来自* VNC内部神经元 ,而不是来自大脑中的下降神经元( 1B - 1G )。
Interneuron * (中间神经元)是仅与其他神经元相连的神经元。
因此,从理论上讲,正是VNC神经调节神经元能够强烈影响运动,在下一步研究中,科学家们检查了VNC中是否有足够的神经调节神经元仅能调节步行行为。 这些神经元被光遗传激活,并使用Flywalker行为分析测量步行速度。

分析显示,仅血清素能性VNC群体的激活(即,未激活多巴胺能或章鱼胺能/泰拉能能)显着降低了mid的平均速度( 1H )。 基于这种观察,科学家决定将所有注意力都集中在血清素能神经元(5-HT VNC )上。

为了证实5-羟色胺的理论并排除其他神经递质的影响,对血清素能(5-HT),多巴胺能(TH),章胺能/泰拉能(Tdc2),谷氨酸能(VGlut),胆碱能(ChAT)和GABA的标记物进行了免疫染色。

实验表明,Trh-Gal4系控制表达5-HT的神经元的表达,并且这些神经元不表达上述任何其他神经递质。 因此,仅存在血清素能神经元。

此外,还进行了实际实验,科学家观察到昆虫自由地穿过小室,从而可以表征5-HT VNC神经元对运动功能的影响。


图2:5-HT VNC神经元调节果蝇的行走速度。

不出所料,5-HT VNC神经元的激活足以降低平均步行速度( 2A )。 奇怪的是,这些神经元的激活不会改变实验对象的总行走时间。 这表明变化的不是个人的整体活动,而是平均运动(行走)速度。

还发现5-HT VNC神经元的激活降低了果蝇的绝对角速度。 也就是说,与对照组相比,实验个体的走步更慢,但走的路更直接。

科学家注意到,该研究方法虽然显示由于5-HT VNC神经元的激活而导致速度降低,但无法显示在现实生活中(自然环境中)这些神经元通常用于调节运动的情况。 为了找到答案,使用钾内部整流通道* Kir2.1来使5-HT VNC神经元组成性失活。
内部整流通道*是离子通道,正离子可通过该通道轻松进入电池,但不能进入。
5-HT VNC神经元的抑制(即“断开”)会导致蚊子更快(2V),这再次证实了先前的实验。 实际上,由5-HT VNC神经元的光遗传激活或组成性抑制引起的速度变化是彼此相反的( 2C )。 此外,5-HT VNC的失活使实验对象的角速度增加,并且也增加了蚊在步行时所花费的时间百分比。

因此,对5-HT VNC神经元激活或失活速率的相互影响表明,VNC中5-羟色胺的释放能够调节基线行走速度。

从以上观察结果可以看出,5-HT VNC神经元的激活/失活在蚊运动期间会有所不同。 为了测试这一点,将蚊子放在跑步机上(不,这不是在开玩笑),并对5-HT VNCS3A过程进行了功能性钙可视化。


S3号图像(来自其他材料):在活动的蚊虫中可视化5-HT VNC神经元(请参见2号图像)。

不仅对整个身体进行了分析,而且对颈椎交界处的纤维也进行了分析,因为这些纤维中的活性与行走密切相关( 2D2E )。 在沿着跑步机( 2F )的每次“行走”开始时,来自这些细胞的荧光钙信号会急剧增加。 当蚊子进行其他运动时,例如象鼻或“洗涤”,这些信号要弱得多。 这些观察结果表明,一部分5-HT VNC神经元在行走过程中活跃,而在一般情况下则不活跃。

还发现这些血清素能过程的活性与平均步行速度正相关。 因此,当一个人走得更快时,这些神经元就会变得更加活跃。

但是,可以假设激活5-HT VNC神经元后行走速度减慢可能是由于运动协调性降低。


图像3:5-HT VNC神经元被激活后,运动继续保持协调。

否则,5-HT VNC的减速和激活与协调无关。 通过分析Flywalker数据检查哪个选项正确。

分析结果表明,5-HT VNC的激活不仅不是协调失调的结果,而且相反。 事实是,慢速行走需要更大的运动协调性,这是在实验( 3A3C )的mid中发现的。 步行过程中mid的移动每条腿的方式充分确认了协调中没有任何干扰( 3B3D )。 顺便说一句,对照组的蚊子(没有人激活任何额外的东西)与激活5-HT VNC神经元的蚊子相比,协调运动较少。

重要的是要考虑到以下事实:运动协调参数和步行参数在所有情况下都不能恒定,因为它们会根据动物的速度不断变化。 例如,当动物走慢时,它们的步幅降低,步幅更长,并降低了摇摆的速度(即在迈步时)。 由于站立的持续时间(步行时身体的单独位置)增加,并且振动的持续时间基本上保持不变,因此这种参数偏移伴随着逐步循环的偏移。

当5-HT VNC神经元被激活时,这些关系保持相关,并扩展到较慢的速度范围( 3E - 3I )。 当蚊虫放慢脚步时,它主要使用4条腿作为支撑(一种较稳定的版本),而使用3条腿则可以快速前进。 激活5-HT VNC神经元后,实验继续使用这种步态( 3J - 3L )。

在某些情况下,例如步幅( 3G )和站立时间( 3I ),神经元激活后运动参数和速度之间的关系是野生mid中相应比率的外推。 但是,在使用三腿支撑( 3J )选择步态的情况下,激活这些神经元时,参数的比率和速度会发生变化。 换句话说,通过5-HT VNC激活行走时单个步幅的步长和持续时间与普通蚊子相当,在三脚架类型步态的情况下,参数速比会发生变化。

众所周知,血清素能系统用于调节步行速度:当系统激活时,mid变慢,而当系统失活时,mid变快。根据这一陈述,科学家决定检查是否需要该系统以自然方式调整基本步行速度。

为了验证这一点,当5-HT VNC神经元失活时,进行了几次实验,并且蚊子宿主环境促进了不同的移动速度(温度变化,身体姿势,食物供应和机械感觉刺激)。

奇怪的是,所有5-HT VNC神经元不活跃的实验对象都继续成功地调节其速度(4A)。


图4:5-HT VNC神经元不活跃时步行参数的变化

发现在所有测试条件下,患有5-HT VNC神经元的实验对象的运动都比对照组快。例如,即使在断开5-HT VNC神经元时,苍蝇在18°C时变慢,在30°C时变快

因此,在广泛的环境条件下,VNC中5-羟色胺的释放会减慢步行速度。这些结果与其中血清素能性VNC系统充当步行速度的软性和本构调节器的模型相符,而不论该速度是由其他机制设定的是多快还是慢。

最奇怪的发现是5-HT VNC神经元的失活会影响对环境突然变化的response的反应。尽管以上结果表明,在许多情况下,mid虫并不需要血清素能VNC系统来调节基线行走速度,但恐惧是一个非常独特的情况,需要研究。

在哺乳动物中,典型的惊吓行为是对各种感觉刺激(听觉,触觉,前庭等)的反应。这些反应非常快,并且包括全身肌肉的同时收缩。与哺乳动物一样,果蝇在惊吓过程中表现出经典的行为-瞬间冻结,然后撤退。

为了测试褪色,5-羟色胺与5-HT VNC神经元活性之间的关系,在两种情况下进行了几次实验:剧烈的黑暗和剧烈的振动。在这两种情况下,受试者都表现出两种行为反应(4B4C4D):首先,他们的许多人几乎完全冻结(0.25秒),然后短暂的停顿(约1秒),然后蚊子开始根据新情况行动。

因此,无论是否引起蚊中惊吓的刺激,血清素能系统不仅是改变运动速度的构成因素,而且还是衰落的调节剂。

研究人员回忆说,所有五个果蝇血清素能受体-5-HT1A,5-HT1B,5-HT2A,5-HT2B和5-HT7-都是G蛋白结合受体(GPCR)。由于恐惧,所有这些受体对运动和反应都有不同的作用。

与5-HT1A受体的个体,Gal4的,1B Gal4的,图2A 的Gal4和7 Gal4的花费在行走更多的时间,行走速度,但只有在与HT7 5-个体增加的Gal45A)。因此,5-HT7是负责血清素间接影响步行速度的主要受体。


图片5:血清素能受体对运动参数的影响。

接下来,检查受体在剧烈振动情况下的影响。 5-HT7 Gal4和5-HT1B Gal4几乎完全复制了Trh01中以及在5-HT VNC失活5C5D5G实验中观察到的褪色反应。但是5-HT1A Gal4和5-HT2A Gal4的持续时间并未显示出明显变化,而是显示了个体的最终速度随着外部刺激(5E - 5G的稳定下降。从这些观察结果可以得出,不同的受体位于惊恐反应的不同方面。

为了更详尽地了解这项研究的细微差别,我建议您研究一下科学家报告其他补充材料

结语


在这项研究中,表明5-羟色胺对运动以及惊吓反应具有直接作用。科学家认为,惊恐时的血清素是一种紧急系统,它会导致蚊虫四肢的组织收缩,从而在运动开始之前引起短暂的停顿。这种暂停可能起重要作用,因为此时神经系统可以收集有关引起惊吓的刺激的其他信息,并决定如何进行。

实验是在果蝇上进行的,但是观察结果可用于分析包括人在内的其他动物的化学和分子过程,因为血清素和麻木反应在各种物种的动物中极为普遍。

将来,科学家计划更详细地研究5-羟色胺对运动的影响,并建立其他以一种或另一种方式调节动物运动的因素。研究人员称自己的主要任务为创建与运动有关的过程的完整分子图。

周五顶峰:

您正在树林中漫步,请勿触摸任何人,但这是您的双胞胎。

星期五摘机2.0:
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谢谢大家的关注,保持好奇心,祝大家周末愉快! :)

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Source: https://habr.com/ru/post/zh-CN478834/


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